På listen fremgår superstjernen Cristiano Ronaldo, der har rundet 38 år og i januar skiftede til saudiarabisk fodbold.
Rygterne har svirret omkring, hvorvidt han ville forsætte på landsholdet. Landstræner Roberto Martínez anser ham stadig som en vigtig brik for holdet.
"Jeg kigger ikke på Ronaldos alder. Han er stadigvæk supervigtig for holdet", siger Martinez på en pressekonference.
Portugal møder Liechtenstein på torsdag i Lissabon, inden holdet tørner sammen med Luxembourg på udebane tre dage senere.
Kampene er starten på Portugals rejse mod at kvalificere sig til EM i Tyskland i 2024. Portugal er havnet i gruppe J, der også består af Slovakiet, Island og Bosnien-Hercegovina.
Roberto Martínez har også valgt at udtage forsvarsklippen Pepe, der fyldte 40 år i februar.
Derudover tæller truppen prominente navne som Bruno Fernandes, Ruben Dias, Bernardo Silva og João Félix.
Det er første landsholdssamling efter VM-slutrunden i Qatar for fire måneder siden, hvor Portugal røg ud i kvartfinalen.
Ronaldo blev vraget til startopstillingen i ottendedelsfinalen, hvor Portugal smadrede Schweiz med 6-1.
Angriberen var endnu en gang på bænken mod Marokko i kvartfinalen, som Portugal tabte 0-1. Den portugisiske superstjerne forlod efterfølgende banen i tårer.
Ronaldos landsholdskarriere begyndte i august 2003 i en venskabskamp mod Kasakhstan. Siden har han spillet 196 kampe og scoret 118 mål.
I 2021 overtog han rekorden som den mest scorende mandlige landsholdsspiller i historien.